日产一线二线三线,国产农村妇女高潮乱叫,调教 sm 重口 h文 hy,国产精品高潮呻吟久久av无码

技術(shù)文章您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > ELISA法檢測干擾素
ELISA法檢測干擾素
更新時(shí)間:2011-12-03   點(diǎn)擊次數(shù):1677次

干擾素(IFN)是一類具有廣譜抗病毒活性的蛋白質(zhì),僅在同種細(xì)胞上發(fā)揮作用。根據(jù)其來源、理化及生物學(xué)性質(zhì)的不同,可分為IFN-α、IFN-β、IFN-γ3種干擾素。其中,IFN-α主要由白細(xì)胞產(chǎn)生,IFN-β由成纖維細(xì)胞產(chǎn)生,IFN-γ主要由T細(xì)胞在免疫應(yīng)答中受到抗原或絲裂原活化后分泌產(chǎn)生。3種干擾素中,IFN-α、IFN-β抗病毒作用較強(qiáng),IFN-丁免疫調(diào)節(jié)作用較強(qiáng)。目前已可用基因重組技術(shù)制備干擾素投入臨床使用。干擾素不能直接滅活病毒,其抗病毒作用是由于它能激活細(xì)胞內(nèi)抗病毒蛋白基因,制造抗病毒蛋白,抑制病毒在體內(nèi)復(fù)制。干擾素不僅可抑制已感染細(xì)胞內(nèi)病毒的復(fù)制,而且還可使未感染細(xì)胞處于抗病毒狀態(tài),對(duì)中斷病毒的細(xì)胞間傳播有一定作用;但對(duì)病毒整合基因可能僅有暫時(shí)抑制其mRNA的轉(zhuǎn)錄作用,不能清除病毒基因。干擾素的免疫調(diào)節(jié)作用表現(xiàn)為它是重要的巨噬細(xì)胞活化因子(macro-phageactivating factor,MAF),活化的巨噬細(xì)胞能殺死病原微生物或殺傷腫瘤細(xì)胞。干擾素能增強(qiáng)各種細(xì)胞表達(dá)MAF分子從而有利于遞呈抗原或利于T細(xì)胞對(duì)靶細(xì)胞的識(shí)別和殺傷;還能促進(jìn)T、B細(xì)胞的分化,活化NK細(xì)胞和中性粒細(xì)胞,從而有助于加強(qiáng)免疫應(yīng)答。由于干擾素不是一種淋巴細(xì)胞的生長因子,故常抑制淋巴細(xì)胞(特別是B細(xì)胞)的增殖。
IFN抗病毒活性的特點(diǎn)如下:①僅僅是抑制作用,IFN消失后病毒將重新復(fù)制,因此必須足量反復(fù)應(yīng)用;②有相對(duì)的種屬特異性,IFN-γ較IFN-α、IFN-β嚴(yán)格;③IFN不直接滅活病毒,而是通過細(xì)胞基因組產(chǎn)生另一些蛋白因子來發(fā)揮效能,因此不同細(xì)胞對(duì)IFN的敏感性不同;④不同感染狀態(tài)的病毒-細(xì)胞系統(tǒng)對(duì)IFN的敏感性不同,病毒大量復(fù)制、引起細(xì)胞炎癥應(yīng)答時(shí),IFN易產(chǎn)生效應(yīng);對(duì)完整細(xì)胞中的整合型病毒無作用。
[檢測方法] ELISA法
[方法學(xué)原理] 抗人IFN抗體包被在微孔反應(yīng)板上,待測標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的IFN會(huì)與抗人IFN抗體結(jié)合,游離的成分被洗去,同時(shí)加入生物素化的抗人IFN抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素。生物素與親和素特異結(jié)合,抗人IFN抗體與結(jié)合在單克隆抗體上的人IFN結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色劑,若反應(yīng)孔中有IFN,HRP會(huì)使五色的顯色劑呈現(xiàn)藍(lán)色,加終止液變。在波長450nm處測吸光度,IFN濃度與吸光度成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中的IFN濃度。
[標(biāo)本準(zhǔn)備] 靜脈血2ml,不抗凝。
[試劑)
1.預(yù)包被微孔反應(yīng)板
2.濃縮酶結(jié)合物
3.酶結(jié)合物稀釋液
4.標(biāo)準(zhǔn)晶和標(biāo)本稀釋液
5.濃縮生物素化抗體
6.TFN標(biāo)準(zhǔn)品
7.濃縮洗滌液
8.顯色劑A、B
9.終止液
[儀器] 酶標(biāo)儀或全自動(dòng)酶聯(lián)免疫檢測儀。
[檢測步驟]
1.在微孔反應(yīng)板相應(yīng)孔中分別加入待測樣本、不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品100ul,再加生物素化抗體工作液50ul。
2.振蕩混勻,置20~25℃環(huán)境中溫育120min。
3.將孔內(nèi)液體吸干,用洗滌液充分洗滌5次,干燥。
4.除空白孔外,加入酶結(jié)合物工作液100u1。
5.振蕩混勻,置20~25℃環(huán)境中溫育30min。
6.將孔內(nèi)液體吸干,用洗滌液充分洗滌5次,干燥。
7.每孔加入顯色劑A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃環(huán)境中避光顯色10min。
8.加入終止液50gl后,輕輕振蕩混勻。用酶標(biāo)儀(450nm波長)測定各孔吸光度,與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)照,求出IFN值。
[正常參考值] 各實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)檢測方法的不同確立正常參考值。
[注意事項(xiàng)]
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出時(shí)應(yīng)在室溫環(huán)境中平衡30min后方可使用,來用完的微孔條用自封袋密封保存。
2.酶標(biāo)板洗滌時(shí)各孔均需加滿洗滌液,防止孔內(nèi)有游離酶不能洗凈。應(yīng)設(shè)定30-60s的洗滌浸泡時(shí)間。
3。滴加試劑前應(yīng)將滴瓶翻轉(zhuǎn)數(shù)次,使液體混勻。滴加時(shí)瓶身應(yīng)保持垂直,以使滴量準(zhǔn)確。
4.所有樣品和廢棄物都應(yīng)按傳染源處理。終止液為2mol/L硫酸,使用時(shí)應(yīng)注意安全
5.每批樣本應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
6.檢測劑工作液按說明書臨用前配置。
7.若標(biāo)本OD值在標(biāo)準(zhǔn)曲線測定范圍以外,應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測。
[臨床意義] IFN水平的改變主要見于自身免疫性疾??;在感染性疾病中,升高見于急性病毒感染,降低見于乙型肝炎病毒攜帶者、其他慢性病毒性肝炎及AIDS患者。
 

上海通蔚生物科技有限公司

上海通蔚生物科技有限公司

地址:上海市金山區(qū)楓涇鎮(zhèn)環(huán)東一路65弄2號(hào)3463室

主營產(chǎn)品:ELISA檢測試劑盒,ELISA試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒,人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,豚鼠ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒,羊ELISA試劑盒,牛ELISA試劑盒,雞ELISA試劑盒,鴨ELISA試劑盒

©2019 版權(quán)所有:上海通蔚生物科技有限公司  備案號(hào):滬ICP備14033764號(hào)-3  總訪問量:1202009  站點(diǎn)地圖  技術(shù)支持:環(huán)保在線  管理登陸

久久日产一线二线三线品牌| 老旺的大肉蟒进进出出视频| 亚洲国产成人精品| 怀孕被躁到高潮的孕妇| av天堂午夜精品蜜臀av| 波多野结衣家庭教师| 国产三级在线观看播放| 动漫AV纯肉无码AV在线播放| 亚洲另类欧美综合久久图片区| 无码熟熟妇丰满人妻啪啪| 精品国产乱子伦一区二区三区| 欧美视频| 国产乱码精品一区二区三区久久| 40岁的女人私密很紧致| 久久久久久无码大片a片| 久久人人爽爽人人爽人人片av| 亚洲色精品三区二区一区| 老师说我考好了就随便我怎样| 无码A级毛片免费视频内谢5J| 777国产偷窥盗摄精品品在线| 未满十八18禁止免费无码网站| 99e久热只有精品8在线直播| 国产女厕所盗摄老师厕所嘘嘘| 久久www免费人成人片| 国产suv精品一区二区88| 好男人资源在线看免费的| 久亚洲一线产区二线产区三线产区| 韩国演艺圈悲惨事件| 久久久国产精品免费a片3d| 亲女禁h啪啪| 久久精品国产久精国产果冻传媒| 久久夜色精品国产噜噜av| 男s严厉调教女m小说| 中文无码人妻在线一区不卡| 国产亚洲精品美女久久久久久| 被吊起来张开腿供人玩弄| 亚洲熟妇少妇任你躁在线观看无码| 歪歪爽蜜臀av久久精品人人槡| 亚洲人成人网站色WWW| 2020国产情侣在线视频播放| 58同城网招聘找工作|