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先用肉湯培養(yǎng)基復(fù)活，此為菌種*代；從營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)物中挑菌液劃相應(yīng)的選擇性培養(yǎng)基平板，選擇典型菌落，接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面，此為菌種第二代；一個(gè)月后，從斜面上挑菌劃相應(yīng)的選擇性培養(yǎng)基平板，選擇典型菌落，接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面，此為菌種第三代；依次下去，直至第五代，就可以不再接了，可以買(mǎi)新的菌種了。

1.選擇復(fù)活用的培養(yǎng)基,可選用說(shuō)明書(shū)中推薦的培養(yǎng)基,根據(jù)菌株的分類(lèi)進(jìn)行選擇,請(qǐng)說(shuō)明購(gòu)買(mǎi)菌株的類(lèi)型或名稱(chēng)；

2.選擇菌株保存的方法：冷凍真空干燥保藏法（可保存10年以上，需真空冷凍干燥機(jī)等設(shè)備）、超低溫保藏（可保存兩年左右，但需有-80℃冰箱）、定期移植保藏法（可保存1-6月） ，請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行選擇；

3.準(zhǔn)備需要的培養(yǎng)基、保存管、甘油、尖頭吸管（有時(shí)常規(guī)吸管太粗，無(wú)法深入菌種管底部）、開(kāi)啟工具等；

4.無(wú)菌開(kāi)啟菌種管，將管內(nèi)干粉溶解轉(zhuǎn)入相關(guān)培養(yǎng)基，培養(yǎng)后選擇保存菌種的代數(shù)；

5.進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)（革蘭氏染色、菌落形態(tài)、生化試驗(yàn)、血清試驗(yàn)或其他鑒定系統(tǒng)等），確認(rèn)后保存菌種，注意整個(gè)過(guò)程的無(wú)菌操作。